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由農(nóng)藥殘留快速檢測儀生化(huà)檢測法開發的速測卡法(酶抑製顯色紙片法)和速測儀法(酶抑製分光光(guāng)度法),前者在80年代在省級部門小範圍使(shǐ)用過,後(hòu)被後(hòu)者取(qǔ)代。目前我省廣泛使用農藥殘留(liú)檢測方法主要有兩大類—色譜檢測法和速測儀法。色譜檢測法用作農殘(cán)定量分析,可為農藥殘留執法提供依據,主要分布(bù)在省級相關(guān)部門,部分地州也具有一定的檢測能力。速測儀法隻能作農(nóng)殘定性(xìng)分析(xī),但它具有短時間能夠檢測大量(liàng)樣本、檢測成本低,對於檢測人員技術水平要求低,易於在基層推廣等特(tè)點,是目前我國控製高毒農藥殘留的一種有效(xiào)方法,也是目前國內和我省應用最為廣泛的農藥殘留快速(sù)檢測方法。廣泛用(yòng)於蔬菜、水果生(shēng)產基地和批發市場等,主要用來防(fáng)止有機磷和氨基甲酸(suān)酯類農藥殘留(liú)嚴重超標的蔬菜和水果流入(rù)市場。
一、有機磷農藥和氨基甲酸酯(zhǐ)農藥的作用機理
有機磷和氨基(jī)甲酸酯類農藥能抑製昆蟲神經中樞和周圍神經係統中乙酰膽堿酶的活性,造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累,影響正常傳導,使昆蟲中毒致死。如(rú)果有有機磷農藥存在,有機磷農藥(yào)就與膽堿酯梅結合,膽堿(jiǎn)酯酶就不能分解乙酰膽堿為乙酸和(hé)膽堿,造成乙酰膽堿在神經肌接頭和體內其它部位的過量積聚(jù),引起一係列神(shén)經中毒症狀。
二、乙酰膽堿酯酶抑製法(酶法)的作用(yòng)原(yuán)理
從生物(wù)化學的角度看,有機(jī)磷(lín)農藥和氨基甲酸酯農藥與乙酰膽堿是競爭(zhēng)性作用於膽堿酯酶的,即膽堿酯酶可以與乙酰膽堿結合,催化乙酰膽堿生成乙酰和膽堿(jiǎn),另一方麵(miàn),如果膽(dǎn)堿酯酶(méi)與有機磷農藥結合,就阻斷了反應的進行。根據這個原理,就可以利用膽堿酯酶(méi)的催化反應的抑製(zhì)法,設計一種通過顏色變化的直觀的檢測方法,來快速檢測有機磷農藥和氨基(jī)甲酸酯農藥的殘留情況。因(yīn)此,生物化學(xué)法(酶法)就是利用某種酶受影響(xiǎng)的程(chéng)度來反映農產品(pǐn)中農藥殘留量。
三、速測儀法(酶抑製分光光度法)方(fāng)法原理
乙酰膽堿酯(zhǐ)酶水解(jiě)後,水解產物可與顯色劑反應(yīng)產生顏色,有(yǒu)機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥可以抑(yì)製乙酰膽堿酯酶的活性,使這種酶不能被水解,從而無顯色反應(yīng)。在(zài)溶(róng)液中加入(rù)乙酰膽(dǎn)堿酯酶(méi)和顯色劑,用此判斷有機磷和氨基(jī)甲酸酯類農藥殘留是否存在(zài)。在溶(róng)液中反應後,用分光(guāng)光度計測定吸光值隨時間的變化,計算出抑製率,以此(cǐ)判斷蔬菜中含有機磷和(hé)氨基(jī)甲酸酯類(lèi)農藥殘留的情況。
四、速(sù)測儀法的優缺點:
優點:在於簡單方便,快捷、成本低(dī)廉。整(zhěng)個檢測過程隻需30分鍾左右,它可以作(zuò)為傳統儀器分析方法的有益補充,針對市場、農場蔬菜農藥殘留量(liàng)進行快速篩選(xuǎn)監測,保證上市蔬菜食用的相對安全性。
缺點:酶試劑易失活,導致反應不穩定,檢測結果誤差較大,重複性不好,實際應用中的確認率大約為60%~70%左右;存在檢測盲區,隻能(néng)檢測有機磷和氨基甲酸酯(zhǐ)兩類農藥,不能(néng)檢測(cè)有機氯類、菊酯和其它類別(bié)的(de)劇毒農(nóng)藥;不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等14種容易出現假陽性的農產品;需要對檢測人員進行專門培訓,否則將(jiāng)會對出現的問題無法正確處理或(huò)判(pàn)斷,得出錯誤的結果。
本文關鍵詞(cí):酶抑製分光光度法