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常見的免疫檢(jiǎn)測技術
時間:2014-12-16 13:34:35 作(zuò)者(zhě): 來源:轉載 點擊:1414次

(一)皮內試(shì)驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激後,體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應(yīng)抗(kàng)原結合後,肥大細胞和(hé)嗜堿(jiǎn)性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質,引起注射抗原的(de)局部皮膚出(chū)現皮(pí)丘及紅暈,以此便可判(pàn)斷體內(nèi)是否某有種特異性抗體存在。


(二)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫(yì)電(diàn)泳(immunoelectrophoresis)


1.免疫擴散 於一(yī)定條件下,抗(kàng)原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時(shí)形成(chéng)肉眼可見的白色沉澱。本法有兩(liǎng)種(zhǒng)類(lèi)型:①單相免疫(yì)擴散:將一定量的抗體混入瓊脂(zhī)凝膠(jiāo)中,使抗原溶(róng)液在凝(níng)膠中擴散而形成沉澱環,其大小與抗原量(liàng)成正比;②雙相免疫擴散:將抗原與抗體分別置於凝(níng)膠板的相(xiàng)對位置(zhì),二者可自由擴散(sàn)並在中間形成沉澱(diàn)線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測(cè)未知抗體,也可用已知抗體檢測未知抗原。


2.免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質凝膠電泳相結合的一項技術。事先將抗原在(zài)凝膠板中電泳,之後(hòu)在凝膠槽中加入相應抗體,抗原和抗體雙相擴散後(hòu),在(zài)比例合適的位置,產生肉眼可見的弧形沉(chén)澱(diàn)線。


(三)間接紅細胞凝集試驗(indirect haemagglutination test,IHA) 以紅細胞作為可溶性抗原的載體(tǐ)並使之致敏。致(zhì)敏的紅細胞與特異性抗體結合而產生凝集,抗(kàng)原與抗(kàng)體間的特異性反應即由此而顯現。常用(yòng)的紅細胞為(wéi)綿羊或O型人紅細(xì)胞。


(四)間(jiān)接熒光抗體試驗 (indirect fluorescent antibody method,IFA)


vvv 本法用熒光素(異硫氰基熒光素)標記第(dì)二抗體,可以進行多種特異性抗原抗體反應,即可(kě)檢測抗原又可檢測抗體。本法具有較高的敏感性、特異性和重現性等優點,除可用於寄生蟲病(bìng)的快(kuài)速診斷,流行病(bìng)學調(diào)查和疫情監測外,還可用於組織切片中抗原定位以及在細胞(bāo)和亞(yà)細胞水平觀察和鑒定抗原、抗體和免疫複合物。


(五)對(duì)流免疫電流試驗 (counter-immunoelectrophoresis,CIE) 對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂(zhī)糖(táng)凝膠(jiāo)為基質的一種(zhǒng)快速,敏感的電泳(yǒng)技術。既可(kě)用已知抗原檢測(cè)抗體,又可(kě)用已知抗體(tǐ)檢測抗原。反應結果可信度高,適用範圍廣。以本(běn)法為基礎改進(jìn)的技術有酶標記抗原對流免疫電泳(enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE )和放射對流免疫電泳自顯影(radio-immuno-counterelectrophoretic autography,RCIEPA)等(děng)技術。二者克服了電(diàn)泳技術(shù)本身不夠靈(líng)敏(mǐn)的弱(ruò)點。


(六(liù))酶聯免疫吸附試驗 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)


vvv 酶(méi)聯免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結合(hé),使其保持免疫反應和酶的活性。把標記的抗(kàng)原或抗體與包被於固相載體上的配體(tǐ)結合,再使之與相應的無色底物作用而顯示顏色,根據顯色深淺(qiǎn)程度目測或用酶標儀測定OD值判定結果。


(七)免(miǎn)疫酶(méi)染色試驗 (immunoenzyme staining test,IEST) 免疫酶染色(sè)試驗以含寄生蟲病(bìng)原的組織切片、印片(piàn)或培養物塗片為固相(xiàng)抗原,當其與(yǔ)待測(cè)標本中的特異性抗體結合後,可再與酶標記(jì)的(de)第二抗體(tǐ)反應形成酶(méi)標記免疫複合物,後者可與酶的相應底物作用(yòng)而出現(xiàn)肉眼或光鏡下可見的呈色反應。


(八)免疫印跡試驗(yàn)(immunobloting technique,ELIB) 免疫印跡試驗又稱免疫印漬或western blot,是由十二(èr)烷基硫酸鈉-聚丙烯酸胺凝(níng)膠電泳(SDS-PAGE),電轉印及固相酶免疫試驗三項技術結合為一體的(de)一種特殊的分析檢測技術。本法具有高(gāo)度敏感性和特異性。



本文關鍵詞:常(cháng)見的免疫檢測技術

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