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酶抑製分光光度法介紹
時間:2014-08-21 15:31:04 作者: 來源:轉載(zǎi) 點擊:1109次

        由農藥殘留快速檢測儀生化檢測法(fǎ)開發的速測卡法(酶(méi)抑製顯色紙片法)和速測儀法(酶抑製(zhì)分光光度法),前者在80年代在省級部(bù)門(mén)小範圍使(shǐ)用過,後被後(hòu)者取代。目前我省廣泛使用農藥殘留檢測(cè)方法主(zhǔ)要(yào)有兩大類—色譜檢測法和(hé)速測儀法。色譜檢測法用作農殘(cán)定量分析,可為農藥殘留執法提供依據,主(zhǔ)要分布在省級相關部門,部分地州也具有一定(dìng)的檢測能力。速(sù)測儀法隻能作農殘定性分析,但它具有短時間能夠檢測大量樣本、檢測成本(běn)低,對於檢測人員技術(shù)水平要求低,易於在基層推廣等特點,是目前我國控製高毒農藥殘留的一種有效方法,也是目前國內和我省應用最為廣泛的農藥殘留快速檢測方法。廣泛用於蔬菜、水果(guǒ)生產基地和(hé)批發市場(chǎng)等,主要用來防止有機磷和(hé)氨基甲酸酯(zhǐ)類農藥殘留嚴重超標的蔬菜和水(shuǐ)果流入市場。

        一、有機磷農藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥的作用機理


        有機磷和(hé)氨基甲酸酯類農藥能抑製昆蟲(chóng)神經中樞和周圍神經係(xì)統中乙(yǐ)酰膽堿酶的活性,造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累,影響正常傳導,使昆蟲中毒致死。如果有有機磷農藥存(cún)在,有機磷農藥就與膽堿酯梅結合,膽堿酯酶就不能分解(jiě)乙酰膽堿為乙酸(suān)和膽堿,造(zào)成乙(yǐ)酰膽堿在神經肌接頭和體內其(qí)它部位的(de)過量積聚,引起一係(xì)列神經中毒症狀。


            二、乙酰(xiān)膽堿酯酶抑製法(酶(méi)法)的作用原理


        從生物化學的角(jiǎo)度看,有機磷農藥和(hé)氨基甲酸酯農藥與乙酰膽堿是競爭性作用於膽堿(jiǎn)酯酶的,即膽(dǎn)堿酯酶可以與(yǔ)乙酰膽堿結合,催化乙酰膽堿生成乙酰和膽堿(jiǎn),另一方麵,如果膽堿酯酶與有機磷農藥結合,就阻斷了反應的進行。根據這個原理,就可以利用膽堿酯酶的(de)催化反應(yīng)的抑製法,設計一種通過顏色變化的直觀的檢測方法,來(lái)快速檢測有機(jī)磷農藥和氨基甲酸酯(zhǐ)農(nóng)藥的殘(cán)留情況。因此,生物化學法(fǎ)(酶法)就是利用某種酶受影響的程度來反映(yìng)農產品中農藥殘留量。


        三、速測儀法(酶抑製分(fèn)光(guāng)光度法)方法原理


        乙酰膽堿酯酶水解後,水解產物可與顯色劑反應產生顏色,有機磷和氨基甲(jiǎ)酸酯類農藥可以抑製乙酰膽堿酯酶的活性,使這種酶不能被水解(jiě),從(cóng)而無(wú)顯色反應。在溶液中加入乙酰膽堿酯酶和顯色劑,用此判斷有機(jī)磷和氨(ān)基(jī)甲酸酯類農藥殘留是否(fǒu)存在。在溶液中反應後,用分光光度計測定吸光值隨時間的變化,計算出抑製(zhì)率,以此判斷蔬菜中含(hán)有機磷和氨基甲(jiǎ)酸酯類農藥殘留(liú)的情(qíng)況。


        四、速測儀法的優缺點:


        優(yōu)點:在於簡(jiǎn)單方便,快捷、成本低廉。整個檢測(cè)過程隻需30分鍾左右,它可以作為傳統儀器分析方法的有(yǒu)益補充(chōng),針對市場、農場蔬菜農藥殘留量進行快速篩選監測,保證上市(shì)蔬(shū)菜食用的相對安全性。


缺點:酶試劑易失活,導致反應(yīng)不穩定,檢測結果誤差(chà)較大(dà),重複(fù)性不好,實際應(yīng)用中的確認率大(dà)約為60%~70%左右;存在檢測盲區,隻能檢測有機磷和氨基甲酸酯兩類農藥,不能檢測有機氯類、菊酯和其它類別的劇毒農藥;不適(shì)合檢測蔥蒜類、香菜、韭(jiǔ)菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑(mó)菇(gū)、花椒等14種容(róng)易出現假陽性的農產品;需要對檢測人員進行專門培訓,否則將會(huì)對出現的問題無法正(zhèng)確處理或判斷,得出錯誤的結果(guǒ)。


本文關鍵詞:酶抑製分光(guāng)光度法

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