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常見的免疫(yì)檢測(cè)技術
時間:2014-12-16 13:34:35 作者: 來源:轉載 點擊:1311次

(一)皮內試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激後,體(tǐ)內產生親細胞(bāo)性抗(kàng)體(IgE和IgG4)。當(dāng)其與相應抗原結合後,肥大細胞(bāo)和嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質,引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈,以此便可判斷體內是(shì)否某有種特異性抗體存在。


(二)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫電泳(immunoelectrophoresis)


1.免疫擴散 於一定條件下,抗原與抗體(tǐ)在瓊脂凝膠(jiāo)中相遇(yù),在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉澱。本法有兩(liǎng)種類型:①單相免疫擴散(sàn):將一定量的抗體混入(rù)瓊脂凝膠中,使(shǐ)抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉(chén)澱環,其大小與抗原量成正比;②雙相免疫擴散:將(jiāng)抗原與抗體分別置於凝膠板的相對位(wèi)置,二者可自由擴散並在中間形成沉澱線。用雙相(xiàng)免疫擴散(sàn)法(fǎ)既可用已知抗原檢測(cè)未知抗體,也可用已(yǐ)知抗體檢測未知抗原。


2.免疫電泳 是將免疫擴散與蛋(dàn)白質凝膠電泳相結合的一項技術。事先將抗原在凝膠板中電泳,之後在凝膠槽中加入相應抗體,抗原和抗(kàng)體雙相擴散後,在比例合適(shì)的位置,產生肉眼可(kě)見的弧形沉澱線。


(三(sān))間接紅細胞(bāo)凝集試驗(indirect haemagglutination test,IHA) 以紅細(xì)胞作為可溶性抗原的載體並使之致敏。致敏的紅細胞與特異性(xìng)抗體結合而產生凝(níng)集,抗原與抗體間的特異(yì)性反應即由(yóu)此而顯現。常用的紅細胞為綿羊或O型人紅細胞(bāo)。


(四)間接熒光抗體試驗 (indirect fluorescent antibody method,IFA)


vvv 本法用熒光(guāng)素(異硫氰基熒光素)標(biāo)記第二抗(kàng)體(tǐ),可以進行多(duō)種特異性抗(kàng)原(yuán)抗體反應,即可檢測抗原(yuán)又可檢測(cè)抗體。本法具有較(jiào)高的敏感性、特異性和重現性(xìng)等優點,除可(kě)用於寄(jì)生蟲病的快(kuài)速診斷,流行病學調查和疫情監測外,還可用於組織切片中抗原定位(wèi)以及在細胞和亞細胞水(shuǐ)平觀(guān)察和鑒定抗原、抗體和免疫複合物(wù)。


(五(wǔ))對流免疫電流試(shì)驗 (counter-immunoelectrophoresis,CIE) 對流免(miǎn)疫電泳試驗是以瓊脂(zhī)或瓊脂(zhī)糖凝膠為基質的(de)一種快速,敏感的(de)電泳技術。既可用已知(zhī)抗原(yuán)檢測抗體,又可(kě)用已(yǐ)知抗體檢測抗(kàng)原。反(fǎn)應結果可信度高,適用範圍廣。以(yǐ)本法為(wéi)基礎改進的技術有酶標記抗原對流免疫電泳(enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE )和放(fàng)射對流免疫電泳自顯影(radio-immuno-counterelectrophoretic autography,RCIEPA)等技(jì)術。二者克服了電泳技術本身不夠靈敏的弱點。


(六(liù))酶聯免疫吸附試驗 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)


vvv 酶聯免(miǎn)疫吸附試驗原(yuán)理是將抗原或抗體與底物(酶)結合,使其保持免疫反應和酶(méi)的活性。把標記的抗原或抗體與包被於固相載(zǎi)體上的配體結合,再使之與相應的(de)無色底物作用(yòng)而(ér)顯示顏色,根據顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定(dìng)結果。


(七)免疫酶染色(sè)試驗 (immunoenzyme staining test,IEST) 免疫酶染色試驗以含寄生蟲(chóng)病原的組織切片、印片或培養物塗片為固相抗原,當其與(yǔ)待測標本中的(de)特異性抗體結合後,可再與酶標記的第二抗體反應形成酶標記免疫複合物,後者可與酶的相應底(dǐ)物作用而出現肉眼或光(guāng)鏡下可見的呈色反應。


(八)免疫印(yìn)跡試驗(yàn)(immunobloting technique,ELIB) 免疫印跡試(shì)驗又稱免疫印漬或western blot,是由十二烷基(jī)硫酸鈉-聚(jù)丙(bǐng)烯酸胺凝膠電泳(SDS-PAGE),電轉印及固相酶免疫試驗(yàn)三項技術結合為一體的(de)一種特殊(shū)的分析檢(jiǎn)測技術(shù)。本法具有高度敏(mǐn)感性和特異性(xìng)。



本文關鍵詞:常見的免疫檢測技術

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