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蔬果中維(wéi)生素C含量(liàng)的檢測(cè)方法
時間:2015-01-27 17:07:59 作(zuò)者: 來源:轉載 點擊:1309次

維生素C又叫抗壞血酸(Ascorbicid),廣泛存在於植物組織中,新鮮的水果、蔬菜(cài)中(zhōng)含量較多。是(shì)一種水溶性小(xiǎo)分子生物活性物質,也是人體需要(yào)量最大的一種維生(shēng)素。維(wéi)生素C具有還(hái)原性(其結構式如圖1),可以與許多氧(yǎng)化(huà)劑發生氧化還原反應,因此可以利用其還原性測定維生素C的含量。目前食品中測定維生素C含量的方法主要有碘量法,是利用維生素C的氧(yǎng)化還原性為基礎的(de)一種氧化還原方法。岡(gāng)其酸度不易把握,碘需要標(biāo)定且易(yì)揮(huī)發,而Vc不易穩定保(bǎo)存,使測(cè)定結果易出現偏差,且這種方法不適合微量分析;國標GB/T6195-1986是采用2,6一(yī)二氯靛酚滴定法。利用樣品溶液由藍色轉變為粉紅色來辨別其(qí)滴定終點的到達(dá)。但是多數(shù)水果、蔬菜樣品其提取液(yè)都具有一定的色澤而(ér)導致滴定終點不明顯,使測定準確度降(jiàng)低。另外(wài)還有熒光光譜分析(xī)法 J、紫外一可見分光度法、色譜法、電化學(xué)法等,這些方法都存在著一定的局限性,如操作過程複雜,所用試劑不穩定,速度(dù)慢、背(bèi)景¨幹擾大。近年(nián)來,建立的測定Vc的其他方(fāng)法還有催(cuī)化動力學和光度法相結合的方法,及(jí)VC傳感器測定方法,固(gù)定(dìng)pH滴(dī)定法等。

該論文將對蔬菜、水果常用的(de)維生素C含量的檢測方法進(jìn)行綜述、比較。


1原子吸收分光光度法

利用原子吸收分光光度法(fǎ)問接測(cè)定維生素C的含量(liàng),是利(lì)用維生素C可以與一些(xiē)金屬離子發生氧化還原反應,通過測(cè)定反應掉的金(jīn)屬離子的量,進而間接計算出維生素c的含量。

1.1以(yǐ)銀離子作為氧化劑的間接原(yuán)子吸收分光光度法

以銀離(lí)子(zǐ)作為氧化劑(jì)的間接原子吸收分光光度法,是利用維生素C分子中的(de)有二烯醇基具強還原性,可被硝酸(suān)銀氧(yǎng)化為去氫維生素(sù)C,同時產生黑色銀沉澱(diàn)

沉澱(diàn)經離心分離(lí)後,將分離(lí)得(dé)到(dào)的沉澱用(yòng)硝酸溶解後,再利用(yòng)原子吸收分光光度計測定銀離子的含量,從而接測得維生素C含量,具體測定方法如下:

配製一係列濃度的維生素C標準溶液,依次吸(xī)取一定(dìng)量(liàng)的維生素C標準溶液置於10mL離心管中,分別加入2mL(1mg/mL) Ag+標(biāo)準(zhǔn)溶液,然後(hòu)加水使總體積為4mL,搖勻,在室溫下避光放置35min離心分離棄去上清液,用2mL超純水洗滌沉(chén)澱3次,然後用l:1的濃硝酸3mL溶解沉澱,移入50mL的容量瓶中,加水稀釋至刻(kè)度。噴入空氣-乙炔火焰分(fèn)別測定其吸光度,以維生素C標準溶(róng)液的濃度為(wéi)橫坐標,以測(cè)得的吸光度值為縱坐標繪製標準曲線(xiàn)。最後將處理過的待測樣按上述方法測定其維生素C含量。

上述方法巾維生素C標準溶液及樣品的配製都是利用2%的檸檬酸(suān)作為溶劑,並在棕色瓶中保存,原因是維生素C在溶液中不穩定,遇氧氣、光、熱(rè)、堿性物質易受破壞,而在適當的酸性條件(jiàn)下比較穩定,用2%的檸檬酸(suān)溶液來配製維生素(sù)C標準(zhǔn)溶液,減緩了維生素C被氧化的速度,同時消除了一定外界因素的十擾,使得(dé)測定結果比較穩定。

1.2 以銅(tóng)離子作為氧化劑的間接原子吸收分光(guāng)光度法

文獻中報道了以銅離子作為氧化劑的間接原(yuán)子吸(xī)收分光光(guāng)度法。該方(fāng)法(fǎ)也是利用維生素C在酸性介質中維生素C可(kě)將Cu2+定量的還原為Cu+,然後Cu+與SCN-反應生成CuSCN沉澱,在高速(sù)離心機下有(yǒu)效地分離出CuSCN沉澱,洗滌後再經濃硝酸溶解,用原子吸收法測定沉澱中的含銅量,即可推知樣品中維生素C的含量。具體測定方法如下:

分別吸取1mL配製(zhì)的含(hán)一定量維生素C的標準(zhǔn)溶液(隨配隨用)(分(fèn)別含維生素C 50、100、200、300、400、500 µg)和樣品提取液(yè),依次放置於已編號的15mL離心管中,各加入1mLCuSO4飽和(hé)溶液、1mL濃度為2%硫氰酸銨溶液、0.5mL鹽酸-醋酸鈉緩衝液和0.5 mL飽和NaCl溶液充分混和,稍後離心分離,棄去上層清液,小心地用少(shǎo)量水洗滌沉澱2~3次(注意每次用水不能超過1 mL),加入0.5mL硝酸(suān)溶解後,轉移至lO0mL的容量瓶中(zhōng)加(jiā)水定(dìng)容(róng)至刻度線(xiàn),搖(yáo)勻。分別用原子吸收分光光度計測定其含銅量,由所得的維(wéi)生素C含量(liàng)的標準曲線,可以得到相應樣品的試驗結果。

該方法所得的試驗結果相對標準偏差RSD在5%以內加標(biāo)回收率在(zài)96.56%~100.67%,其精密度和準確度均達到痕量分析要求。此方法的線性相關係數R=O 9989,表明相關性很好。

2紫外可見分光光度法

利用紫外分(fèn)光光度法測定維生素(sù)C的含量是基於維生素c在紫外光區有特征吸收,但是因為(wéi)維生素C結構中具(jù)有不飽和鍵,具有還原性,不易穩定存在,直接測定誤(wù)差較大(dà)。所以在(zài)利用紫外分光光度法測定時,維生素標(biāo)準溶液和待測樣的配製條件非常重要。曾國富,黃玉(yù)英研究(jiū)發(fā)現,維生索(suǒ)C在CTAB-C5H11OH-H2O微乳液體係中非(fēi)常穩(wěn)定(dìng),它存(cún)在於微乳液滴膜的(de)內側(cè),與滲透進(jìn)入液滴(dī)膜外側的溶液氧接觸(chù)的機會極少,該體係能極大(dà)地提高維生素C的穩定性(xìng)。

鄭京平等利用維生素(sù)C具有對紫外產(chǎn)生吸收(shōu)和(hé)對堿穩定的特性,建(jiàn)立(lì)了紫外分光光度快速測定(dìng)水果、蔬菜維生素(sù)c的新方法。根據維(wéi)生素C具有對紫外產生吸收和對堿不穩定的特性,於波長(zhǎng)243nm處測定樣品(pǐn)溶液與堿處理樣品兩者吸光度之差(chà),通過查校準曲線,即可計算樣品巾維生素C的含量。此法操作(zuò)簡單、快速準確、重現性好,結果令人滿(mǎn)意。特別適合含深色樣品的測定。實驗結果表明該方(fāng)法簡單易行,結果準確、靈敏度高,檢出限低,可快速測定水果、蔬菜中維生素C,值得推廣應用。

張立科等介紹了在0~450µg/mL線性範圍內,以cu2+作催化劑,以溶(róng)解氧將還原型維生素C氧化為在246.0 nm處無吸(xī)收的氧化型(xíng)Vc,實現了樣品各紫外幹擾成分的本(běn)底校(xiào)正,建立了種測定果蔬Vc的新(xīn)方法。該方法(fǎ)中維生素C破壞條件(jiàn)的選擇尤為(wéi)重要,確定條件為:Cu用量為30 g,反應溫度為70℃,反應時間為20min,加熱條(tiáo)件下(xià),反應速度(dù)快,無需加掩蔽(bì)劑。方法簡便、快速、準(zhǔn)確,測定了香蕉、西紅柿等果蔬中的VC含量,結果令人滿意。經多次實驗得出該方法RsD在0.32%~0.89%之間,實際測定了香蕉、西紅柿等樣品中的(de)VC的含量,檢出(chū)限為0.2791g/mL,加標回(huí)收率(lǜ)在97.16%~100.18%之間 。

3高(gāo)效液相色譜法

前麵介紹的(de)方法由於在使用中有一定(dìng)的限製,操作(zuò)複雜(zá)、前處理較麻煩。因此在使(shǐ)用中有較大的局限性,目的已逐漸被高效液相色譜法所(suǒ)取代(dài)。HPLC法具有檢測速(sù)度快、操作簡單、實(shí)驗結果可靠等特點。

王豔穎,薑國斌(bīn)等采用HYPERSIL-C8fz譜柱、濃度0.1%的草酸作流(liú)動相的高效液相色譜法,分析了草莓中的維生(shēng)素c含量,取得了理想的(de)效(xiào)果。HPLC檢測條件如下(xià):

流動相0.1%草酸(suān)溶(róng)液,流速1.0 mL/min;檢測波長254 nm,進(jìn)樣量5µL,柱箱溫度3O℃。該方法分析中(zhōng)受樣品中其他雜(zá)質的影響(xiǎng)較(jiào)小。測定草莓中(zhōng)維生素C的(de)含量,回收率為97.4%~102.1%,說明該方法具(jù)有(yǒu)所需試劑少、穩定、操(cāo)作簡便(biàn)等特(tè)點。精密度實驗的相對標準偏差小於(yú)3%,說明該方法重複性和再現性都(dōu)是比較高的(de)。

陳昌雲等采用(yòng)0.05 mol/L磷酸二氫鉀緩衝液:甲醇=80:20(v/v)作流動(dòng)相。流速為(wéi)1.0 mL/min,二極管陣列檢測器,檢測波長為254 nm。測定蜜柚中維生素C含量在質量濃度為20~100mg/L範圍內有(yǒu)良好的線性關(guān)係,方法回收率為92.4%~107.5%,相(xiàng)對標準偏差小於2%。

4 結語(yǔ)

測定(dìng)維生素C含量方法很多,各種方法各有優缺點,因(yīn)為(wéi)維生素C自(zì)身(shēn)的不穩(wěn)定,導致了很多方法測定結果(guǒ)誤差較大,所以對維生素C穩定(dìng)存在條件(jiàn)的探索非(fēi)常重要。高效液相色譜法因(yīn)為測定(dìng)較準確、靈敏度(dù)高、選擇性好,有較好的發展前景,是目前發展較快的一種方法(fǎ)。


本文關鍵詞:維生(shēng)素C含量的檢測方法

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